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传统电泳仪性能特点归纳

发布时间:2022年04月21日    点击:[2]人次

传统电泳仪性能特点归纳

电泳是电解质中带电粒子在电场作用下,以不同的速度向电荷相反方向迁移的现象。利用电泳现象对化学和生物化学组分进行分离的仪器称为电泳仪。从20世纪30~40年代起,相继发展了多种基于抗对流载体的电泳仪。传统电泳仪由于受到焦耳热的限制,只能在低电场强度下进行电泳,分离时间长,分离效率低。传统电泳根据有无载体可分为无载体电泳和载体电泳。无载体电泳是在液体介质中进行电泳,有自由界面电泳。载体电泳是在固体介质中进行电泳,载体的主要作用是防止电泳过程中的对流和扩散,使被分离物得到较大分辨率的分离,有纸电泳、醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-PAGE电泳、琼脂糖凝胶电泳、等电聚焦电泳和等速电泳等。一、自由界面电泳:1、原理:溶液在U型管中,根据样品各组分泳动速度的不同进行分离。2、特点:没有载体,对流比较严重,组分不能完整分离,成分相互重叠,检测困难。3、应用:目前很少用。二、纸电泳:1、载体:滤纸。2、原理:由于载体孔径大,没有分子筛效应,主要根据样品各组分质荷比的不同进行分离。3、特点:滤纸结构疏松,微孔较大,致使电泳速度慢,时间长,样品扩散严重,分辨率低。4、应用:多用于核苷酸的分离。三、醋酸纤维素薄膜电泳:1、载体:醋酸纤维素薄膜。2、原理:由于载体孔径大,没有分子筛效应,主要根据样品各组分质荷比的不同进行分离。3、与纸电泳相比的优点:电渗影响小,化学惰性好,能将对流降到较小。4、应用:适用于蛋白质和同工酶等的分离分析,特别适合病理情况下微量异常蛋白质的检测。四、聚丙烯酰胺凝胶电泳:1、载体:聚丙烯酰胺凝胶。2、原理:质荷比和分子筛效应。3、特点:机械强度好,透明有弹性,化学性能稳定,无吸附作用,几乎无电渗作用,可制成不同孔径的凝胶,分辨率高。4、应用:用于蛋白质和较小分子核酸的分离。五、SDS-PAGE电泳:1、载体:聚丙烯酰胺凝胶。2、原理:分子筛效应。3、特点:样品无需纯化,操作简便快速,重复性高。4、应用:目前测定蛋白质亚基相对分子量的较好方法。六、琼脂糖凝胶电泳:1、载体:琼脂糖凝胶。2、原理:分子筛效应。3、特点:凝胶孔径大,对样品吸附极微,分辨率高,重复性好。4、应用:用于核酸的分离。七、等电聚焦电泳:1、载体:聚丙烯酰胺凝胶等。2、原理:利用蛋白质分子或其它两性分子等电点的不同,在一个稳定、连续、线性的pH梯度中进行分离。3、特点:分辨率高,区带清晰且窄,分辨率至少可达0.01 pH单位。4、应用:分离对象只限于蛋白质和其它两性分子,常用于同工酶的分离分析和pI测定。八、等速电泳:1、载体:聚丙烯酰胺凝胶等。2、原理:用淌度比样品中任何组分的淌度都大的电解质作为先导电解质,用淌度比样品中任何组分的淌度都小的电解质作为尾随电解质,样品组分夹在先导电解质和尾随电解质之间,根据各自淌度的不同进行分离。3、特点:区带界面明显,具有富集和浓缩作用。4、应用:目前应用不多。

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